Diagnóstico laboratorial da resistência à oxacilina em Staphylococcus aureus / Laboratory diagnosis of oxacillin resistance in Staphylococcus aureus

Apesar das diversas recomendações disponíveis na literatura sobre o diagnóstico laboratorial da resistência à oxacilina em Staphylococcus aureus, a verdade é que ainda não existe consenso absoluto sobre qual ou quais métodos utilizar e quando utilizar cada um deles. Segundo a literatura, a maioria dos métodos disponíveis apresenta um índice não desprezível de erros diagnósticos. Em casos de isolados de processos infecciosos invasivos, ou de infecções persistentes e/ou refratárias aos antimicrobianos, o uso de um método adicional ou confirmatório pode ser importante. Além disso, a contínua reavaliação desses testes é necessária.

Despite guidelines published in the literature, the optimal routine phenotypic method for detecting methicillin resistance in Staphylococcus aureus remains controversial. Most available methods have a considerable rate of errors, according to the literature. When testing invasive isolates or isolates from persistent/refractory infections, using an additional or confirmatory method could be important. In addition, the continual evaluation of these tests is necessary.

A pharmacodynamic strategy to optimize empirical antibiotic therapy for gram-negative bacteria in a Brazilian Intensive Care Unit

Pharmacodynamic analyses were proposed to determine optimal empirical antibiotic therapy against Gram-negative bacteria isolated in a Brazilian ICU. Due to high resistance rates, standard regimens of cefepime, ciprofloxacin, meropenem, and piperacillin/tazobactam were not able to attain significant bactericidal CFR. Prolonged infusion of meropenem achieved 88 percent CFR, making it a possible empirical regimen in this ICU until susceptibilities become available. Still, even through administration of high dose prolonged infusions, 12.0 percent of simulated subjects did not achieve bactericidal exposure, suggesting that combination therapy would frequently be required in this setting. In conclusion, we recommend that in the presence of identified resistance problems among Gram-negative bacteria in a unit or hospital, MIC testing of formulary agents should be conducted along with pharmacodynamic simulation to assist in choosing an optimal antibiotic and dosage regimen for empirical use of severe infections until cultures and susceptibilities become available.

Colonização de orofaringe por Streptococcus pneumoniae em crianças de creches municipais de Taubaté-SP: correlação entre os principais sorotipos e a vacina pneumocócica conjugada heptavalente / Oropharyngeal carriage of Streptococcus pneumoniae by children attending day care centers in Taubaté, SP: correlation between serotypes and the conjugated heptavalent pneumococcal vaccine

Objetivos: o Streptococcus pneumoniae habitualmente coloniza a orofaringe de pessoas sadias. O estado de portador assintomático está relacionado à invasão de estruturas adjacentes e ao surgimento de doença invasiva. Foi realizado estudo transversal, descritivo, objetivando verificar a prevalência de colonização de orofaringe pelo S.pneumoniae em crianças que freqüentam creches no município de Taubaté, SP, verificar a freqüência de sorotipos de Streptococcus pneumoniae nas cepas isoladas e relacionar os soro tipos mais freqüentes com os sorotipos presentes na composição da vacina pneumocócica heptavalente conjugada atualmente em uso.Métodos: foram coletados, de 29 de junho a 15 de dezembro de 1998, 987 swabs de orofaringe de crianças entre 8 e 71 meses de idade, matriculadas nas creches municipais de Taubaté, SP. A identificação do S. pneumoniae foi baseada na observação das colônias que apresentassem hemó1ise parcial nos meios AS e AS-G, e pela observação da inibição do crescimento ao redor do disco de optoquina. A sorotipagem foi realizada pela reação de Quellung, utilizando anti-soros específicos, e adotado o sistema de nomenclatura dinamarquês. Resultados: o Streptococcus pneumoniae foi isolado em 209 das 987 crianças (taxa de colonização= 21,1por cento). Vinte e oito sorotipos foram identificados. Os 7 sorotipos mais freqüentes foram: 6A/6B (21,5por cento), 19F (14,8por cento), 18C (7,4por cento), 23F (7,4por cento),9V (6,7por cento),14 (5,2por cento) e 10A(4,4por cento). Com exceção do sorotipo 10A, todos os outros seis estão incluídos na vacina. O único sorotipo vacinal não encontrado foi o sorotipo 4. Conclusão: estima-se, então, uma concordância de 63por cento entre os sorotipos colonizadores de orofaringe e os soro tipos presentes na vacina

In vitro susceptibility of gram-positive cocci isolated from skin and respiratory tract to azithromycin and twelve other antimicrobial agents

This study was conducted to evaluate the activity of azithromycin in comparison to 112 other antibacterial agents against recent isolates obtained consecutively from patients with respiratory tract or skin infections, from january to july, 2000. A total of 717 gram-positive cocci were analyzed in this study and the following species were studied: staphylococcus aureus (n=576), ß-hemolytic streptococci (n=115), and streptococcus pneumoniae (n=26). Susceptibility testing was carried out by the disk diffusion method and interpreted according to NCCLS breakpoints. The activity of azithromycin was compared to erythromycin, clindamycin, chloramphenicol, ciprofloxacin, ofloxacin, oxacillin, penicillin, ceftriaxone, tetracycline, trimethoprim/sulfamethoxazole, teicoplanin, and vancomycin. Of the 26 S. pneumoniae isolates recovered from the respiratory tract, 5 (19.2 percent) were imediate resistant to penicillin. All of these strains were susceptible to chloramphenicol, ofloxacin, and vancomycin, and 24 (92 percent) were also susceptible to azithromycin, clindamycin, and erythromycin. Among the 67 ß-hemolytic streptococci strains isolated from the respiratory tract, 66 (99 percent) were susceptible to azithromycin, erythromycin, clindamycin, and ofloxacin. All 48 ß-hemolytic streptococci strains isolated from skin were susceptible to azithromycin and clindamycin, 47 (98 percent) were susceptible to erythromycin, and 46 (96 percent) were susceptible to ofloxacin. Of the 576 strains of S. aureus, 253 (43.9 percent) were isolated from the respiratory tract and 323 (56.1 percent) from skin. Among S. aureus isolates from the respiratory tract and skin, 46 (18 percent) and 78 (24 percent), respectively were resistant to oxacillin. Isolates from the respiratory tract and skin showed the same percentage of resistance (36 percent) to azithromycin. These in vitro results suggest that azithromycin can be a therapeutic option for treatment of infections caused by these bacteria since the never macrolides have several distinct advantages over erytromycin including improved oral bioavailability, longer half-life allowing once or twice daily administration, higher tissue concentrations and less gastrointestinal adverse effects.

Avaliaçäo de dois métodos moleculares para tipagemepidemiológica de cepas de Acinetobacter baumanniii responsáveis por surto de infecçäo hospitar / Evaluation of two molecular methods for epidemiological typing of acinetobacter baumannii strains resposible for an outbreak of hospital infection

No período de dezembro de 1993 a dezembro de 1996, foram isoladas 549 cepas de A. baumannii de pacientes internados no Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de Säo Paulo (HC-FMUSP, Brasil). Trinta e cinco cepas, das quais 21 epidemiologicamente relacionadas, foram utilizadas para avaliaçäo de duas metodologias moleculares de tipagem, respectivamente, eletroforese em campo elétrico variável (PFGE) e reaçäo em cadeia da polimerase com iniciadores arbitrários (AP-PCR). O objetivo deste estudo foi avaliar estes dois métodos moleculares e seu poder discriminatório para a caracterizaçäo de amostras de A. baumannii. Entre as 35 cepas analisadas, a metodologia de PFGE discriminou 12 padröes principais (A-L). Por outro lado, a metodologia de AP-PCR discriminou somente nove padröes (I-IX). A concordância entre as duas metodologias foi observada em 27 (77 por cento) das 35 amostras. As duas metodologias mostram-se muito eficientes na tipagem das cepas de A. baumannii. A metodologia de AP-PCR, como é rápida e de fácil execuçäo, pode ser usada como método inicial de tipagem, enquanto a metodologia de PFGE, por seu maior poder discriminatórios, pode ser usada nas cepas que näo puderam ser discriminadas por AP-PCR, mas requer mais trabalho e apresenta maior custo

Acinetobacter baumannii: importância clínica e diagnóstico laboratoirial / Acinetobacter baumannii: clinical importance and laboratorial diagnosis

O Acinetobacter baumannii é um importante agente causador de infecçöes hospitalares e tem se caracterizado por apresentar resistência a diversos agentes antimicrobianos. Esta bctéria desempenha papel significativo na colonizaçäo e infecçäo em pacientes hospitalzados, principalmente naqueles internados em unidades de terapia intensiva e com graves doenças de base. Vários mecanismos de resistência a antimicrobianos têm sido reconhecidos nesta bactéria e, geralmente, associaçöes antibióticas säo utilizadas no tratamento de infecçöes hospitalares por esta bactéria

Avaliaçäo de um novo sistema para identificaçäo de bacilos gram-negativos / Evaluation of a new system for identification of gram-negative bacilli

Uma nova metodologia para a identificaçäo de bacilos Gram-negativos de importância médica, denominada Crystal Enteric/Nonfermenter Identification System (Becton & Dickinson Microbiology Systems, EUA), foi avalida comparativamente com o sistema automatizado Vitek (bioMérieux Vitek, EUA). Duzentas e quarenta e nove amostras bacterianas isoladas a partir de diversos materiais clínicos e pertencentes a diversas espécies bacterianas da família Enterobacteriaceae (189 amostras) e também ao grupo dos bacilos Gram-negativos näo-fermentadores da glicose (60 amostras), previamente identificadas por provas bioquímicas tradicionais, foram aalisadas no intuito de se avaliar a especificidade destas duas metodologias. Duzentas e vinte e cinco amostras bacterianas (90,4 por cento) foram corretamente identificadas pelo sistema Crystal e 230 amostras (92,4 por cento) foram corretamente identificadas pelo sistema Vitek. Em relaçäo aos bacilos Gram-negativos näo-fermentadores da glicose, dentre as 60 amostras bacterianas estudadas, 51 (85 por cento) foram corretamente identificadas pelo sistema Crystal e 50 (83,3 por cento) foram corretamente identifcadas pelo sistema Vitek. Do total de amostras estudadas, 14 (5,6 por cento) näo foram identificadas e cinco (2 por cento) foram incorretamente identificadas pelo sistema Crystal, enquanto que o sistema Vitek näo identificou cinco amostras (2 por cento) e identidicou incorretamente nove amostras (3,6 por cento). Os resultados obtidos demonstraram que o sistema Crystal é uma metodlogia confiável, simples de usar, näo necessitando equipamentos automatizados ou reagentes especiais, podendo ser adequadamente utilizada por laboratórios de Microbiologia para a identificaçäo de diversas espécies de bacilos Gram-negativos de importância clínica

Evaluation of the in vitro activity of cefprozil relative of other oral antimicrobial agents against bacteria in clinical specimens from patients in Säo Paulo with respiratory tract infections

Cefprozil is a new oral second generation cephalosporin. Its in vitro antimicrobial activity was evaluated against 371 recent clinical isolates from patients with respiratory infections. We tested the susceptibility of 244 streptococci (96 Streptococcus pneumoniae, 105 group viridans streptococci, 32 Streptococcus agulactiae, and 11 group A ß-hemolitic streptococci) 107 Haemophilus influenfae, and 20 oxacilin-susceptible S.aureus (OSSA). The isolates were susceptibility tested cefprozil, cefactor and amoxicillin/clavulanic acid by the E-test method; and against cefadroxil, cefuroxime, cefetamet, erythromycin, and azythromycin by disk diffusion. The methods and the susceptibility categorization followed the National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS) procedures. Amoxicillin/clavulanic acid was slightly more active against H.influenzae (MIcs900.5µg/mL) than cefprozil or cefaclor(MICs90 4 and 2µg/mL respectively). Cefprozil demonstrated potent activity against streptococci. Against S. pneumoniae, cefprozil was 2-4 fold more active than cefaclor (MICs90 0.125 and 0.38µg/mL, respectively). S.pneumoniae susceptibility was 84 percent to penicillin, 95 percent to erythromycin and 97 percent to azithromycin by disk diffusion. Viridans streptococci showed higher MICs for cefprozil and cefaclor (MICs90 4 and 2µg/mL respectively). Cefprozil demonstrated potent activity against streptococci. Against S.pneumoniae, cefprozil was 2-4 fold more active than cefaclor (MICs90 0.125 and 0.38 µg/mL, respectively). S.pneumoniae susceptibility was 84 percent to penicillin, 95 percent to erythromycin and 97 percent to azithromycin by disk diffusion. Viridans streptococci showed higher MICs for cefprozil and cefaclor (MICs90 4µg/mL and 8µg/mL, respectively) and only 50 percent susceptibility to the macrolides. Cefprozil was 4-fold more active than cefaclor and as active as amoxicillin /clavulanic acid against group A ß-hemolytic streptococci and S.agalactiae. These three comounds showed similar activity against OSSA. In conclusion, cefprozil demonstrated excellent in vitro activity against bacterial species responsible for respiratory infections in Säo Paulo.

Importância do laboratório de microbiologia no apoio à investigaçäo de surtos de infecçäo hospitalar / Importance of the microbiology laboratory in the support of nosocomial infections investigation

O controle das infecçöes hospitalares é assunto complexo, que exige a participaçäo de clínicos, epidemiologistas e microbiologistas. Este último deve ser responsável tanto pelo diagnóstico etiológico das infecçöes hospitalares quanto pela investigaçäo microbiológica dos surtos e epidemias. As informaçöes normalmente fornecidas pelo laboratório de microbiologia, tais como identificaçäo em nível de espécie, padräo de sensibilidade a antimicrobianos (antiobiograma) e biotipo, podem ser suficientes para estabelecer uma relaçäo entre diferentes amostras em alguns casos. Porém uma caracterizaçäo mais detalhada, ou seja, uma tipagem com finalidade epidemiológica, se faz necessária na maioria dos casos. A razäo para uma melhor caracterizaçäo é que o isolamento repetido (em um ou mais pacientes) de um microrganismo com cacterísticas idênticas sugere que esses microrganismos tenham se originado de um único clone, tornando mais provável a hipótese de infecçäo (no caso de um mesmo paciente) ou de transmissäo de um paciente para o outro através de uma fonte e/ou mecanismo comum. Nesta revisäo, abordaremos alguns aspectos gerais relacionados às aplicaçöes dos métodos de tipagem epidemiológica e controle de infecçöes hospitalares, e descreveremos vários métodos moleculares de tipagem e suas aplicaçöes em estudos epidemiológicos de patógenos hospitalares

Atividade in vitro da cefepima em comparação com outras cefalosporinas de amplo espectro contra amostras clínicas de 18 hospitais brasileiros / In vitro activity of cefepime in comparisiom with others cephalosporins of extended-spectrum agaisnt clinical amostra of 18 brazilians hospitals

INTRODUÇÄO: A cefepima é uma cefalosporina de quarta geraçäo lançada recentemente tanto no Brasil quanto nos Estados Unidos. Trabalhos internacionais têm mostrado que esse composto apresenta maior potência tanto contra bacilos gram-negativos quanto cocos gram-positivos aeróbios, quando comparada com as cefalosporinas de terceira geraçäo. OBJETIVO: Avaliar a atividade antimicrobiana da cefepima em comparaçäo com ceftazidima, ceftriaxona, cefotaxima e imipenem em amostras clínicas isoladas em hospitais brasileiros. MATERIAL E MÉTODOS: Foram estudadas 982 amostras clínicas coletadas durante o periódo de dezembro de 1995 a março de 1996. Foi incluída apenas 1 amostra por paciente. As amostras foram testadas através do método de E test seguindo as recomendaçöes do National Commitee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). RESULTADOS: O espectro de ação da cefepima foi superior àquele apresentado pelas outras cefalosporinas de amplo espectro tanto contra bacilos Gram-negativos quanto contra cocos Gram-positivos. A superioridade da cefepima foi mais evidente contra Enterobacter sp. (MIC90, 2µg/ml), Serratia sp. (MIC90, 2µg/ml) e S. aureus sensível à oxacilina (MIC90,3µg/ml). Contra P. aeruginosa, a cefepima (MIC90, 16µg/ml) foi somente um pouco mais ativa que a ceftazidima (MIC90, 32µg/ml) e 8 a 16 vezes mais ativa que a ceftriaxona ou a cefotaxima (MIC90, > 256 µg/ml). DISCUSSÄO: Nossos resultados mostram que bactérias hospitalares, especialmente bacilos Gram-negativos, apresentam altas taxas de resistência às cefalosporinas no Brasil. Porém, uma parte dessas amostras multirresistentes permanecem sensíveis à cefepima

Avaliaçao de um novo sistema para detecçao de micobactérias: "mycobacterium growth indicator tube" (MIGIT) / Evaluation of a new system for the detection of mycobacteria: mycobacterium grouth indicator tube (MGIT)

Com o objetivo de avaliar uma nova metodologia para detectar o crescimento de micobactérias, analisamos 159 materiais clínicos previamente selecionados pelo método de Ziehl-Neelsen (149 positivos e 10 negativos), provenientes de diversos pacientes do Hospital das Clínicas da FMUSP. As amostras foram descontaminadas e concentradas pelo método do NALC (N-acetil-L-cisteína), examinadas pela coloraçao de Ziehl-Neelsen e 0,5ml de cada amostra tratada foi inoculada diretamente no MGIT ("Mycobacterium Growth Indicator Tube", Becton Dickinson Microbiology Systems, EUA) e o mesmo volume foi inoculado no meio e Lowenstein-Jensen (LJ). Os tubos de MIGT e de LJ foram incubados a 37 graus e observados diariamnte quanto ao crescimento e emissao de fluorescência. Para as leituras do MGIT foi utilizada uma luz UV de 365 nm e as culturas no meio de LJ foram observadas visualmete quanto ao crescimento. O MGIT contém 4,5 ml de meio Middelbrook 7H9 enriquecido e um sensor de fluorecência na base do tubo, sensíve ao oxigênio. Havendo crescimento de micobactérias, o seu metabolismo resulta em um consumo de oxigênio, ocasionando um aumento de fluorescência. Das 149 amostras com pesquisa positiva pelo método de ZIehl-Neelsen, 144 amostras foram positivas no MGIT, sendo 53 positivas na primeira semana e 78 na segunda semana de incubaçao. Das 131 amostras positivas no meio de LJ, a maioria apresentou crecimento após 15 dias de incubaçao. O MIGIT provou ser um sistema simples, rápido e sensível para detectar o crecimento de micobactérias diretamente de espécimes clínicos

Estudo comparativo da atividade in vitro da apicilina/sulbactam e outros agentes antimicrobianos frente a bactérias isoladas de diversos materiais clínicos / Comparative study of in vitro activity of ampicillin/sulbactam and other antimicrobics aginst bacteria isolated from several clinical specimens

Um total de 4.813 amostras bacterians, recentemente isoladas de diferentes materiais clínicos, foram testadas frente a 33 diferentes antimicrobianos, pelo método da difusão e disco e analisados de acordo com os padrões estabelecidos pelo National Commitee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Os resultados mostraram que a Ampicilina/Sulbactam apresentou uma ação extremamente eficaz frente à grande maioria das bactérias estudadas, 92,16 por cento de amostras sensíveis, quando comparado com a Ampicilina (54,63 por cento) e com os demais antimicrobianos testados. A Ampiclilina/Sulbactam mostrou-se também bastante eficiente frente a microorganismos fastidiosos, como o H. influenzae e N. gonorrhoeae, com 100 por cento das amostras testadas sensíveis. Concluímos que a Ampicilina/Sulbactam é um antibiótico com potente atividade "in vitro" frente às bactérias mais comumente isoladas de processos infecciosos.

Identificaçåo de bactérias gram positivas resistentes à vancomicina / Identification of vancomycin resistant gram positive bacteria

Infecçöes por bactérias Gram positivas resistentes à vancomicina têm surgido com aior frequência nos últimos anos, causando problemas clínicos e terapêuticos. Os laboratórios de microbiologia devem adequar-se técnicamente para detecçåo e identificaçåo destes microorganismos. Apresentamos uma revisåo bibliográfica sobre a importância clínica destes agentes bem como um fluxograma simplificado para sua correta identificaçåo

Avaliaçåo do "E Teste", um novo método para determinaçåo da concentraçÅo inibitória mínima de antimicrobianos / Evaluation of the \"E Test\", a new method for minimal inhibitory concentration (MIC) determination

O "E Teste" é um novo conceito para testes quantitativcos de sensibilidade, baseado em um gradiente pré definido do antibiótico incorporado em uma fita plástica. É usado para determinar a concentraçåo inibitória mínima (MIC) de antibióticos frente a bactérias crescendo em ágar. Os resultados obtidos pelo "E Teste" foram avaliados comparando-se com o método de diluiçåo em ágar e com o método da difusåo do disco, frente a 5 antimicrobianos e 50 bactérias. A correlaçåo entre as MICs pelos métodos da diluiçåo e "E Teste" foi boa, com 95,6 por cento dos resultados dentro de uma faixa de até 2 log2 das diluiçöes das drogas, num total de 250 testes. O "E Teste" é uma técnica versátil e confiável para determinaçåo de MICs de diferentes antibióticos em Laboratórios Clínicos de rotina

Infecçäo por Malassezia fufur: um alerta / Systemic infections by Malassezia furfur: alert

A Malassezia furfur é um fungo saprófita, lipofílico, encontrado frequentemente na pele de seres humanos, sendo responsável pela pitiríase versicolor, doença dermatológica benigna. Os casos de fungemia já descritos estäo frequentemente relacionados ao uso de cateteres centrais, à administraçäo de intralípides e ao tempo prolongado de hospitalizaçäo, principlamente em neonatos. Relatamos o isolamento da M.furfur, ao acaso a partir de mielocultura, em criança de 1 ano e 8 meses, portadora de Histiocitose X, em tratamento quimioterápico no Hospital das Clínicas da FMUSP (HC-FMUSP)

Epidemilogia molecular de infecçöes hospitalares sequenciais em uma unidade de terapia intensiva causada por cepas multiresistentes de Klebsiella pneumoniae / Molecular epidemiology of sequencial hospital infections in an intensive care unit by multiresistant Klebsiella pneumoniae

Foram estudadas, durante o período de um ano, 17 amostras de Klebsiella pneumoniae isoladas de pacientes internados em uma unidade de terapia intensiva e com infecçöes hospitalares diversas, com o objetivo de se averiguar a identidade das cepas envolvidas. A investigaçäo laboratorial envolveu a caracterizaçäo bioquímica, a determinaçäo do padräo de sensibilidade aos antimicrobianos e análise do conteúdo de DNA plasmidial dos microrganismos isolados. Os resultados mostraram que a análise do conteúdo plasmidial é uma metodologia bastante útil para diferenciar amostras bacterianas multirresistentes pertencentes a uma única espécie, bem como é mais sensível que a biotipagem e o antibiograma. Constatou-se também que a metodologia da Biologia Molecular permitiu o rastreamento das cepas envolvidas pelo estudo da disseminaçäo de plasmídios "R". Concluiu-se que a implantaçäo da metodologia da genética molecular vem proporcionar sistema preciso e confiável de vigilância epidemiológica facilitando a execuçäo de medidas de ordem técnico-administrativas no controle e prevençäo das infecçöes hospitalares